免疫组化多聚甲醛配制_溶液_粉末_注意事项

摘要：

免疫组化实验中多聚甲醛配制

于免疫组化〔IHC〕实验中，固定剂选择对实验结果至关很大。多聚甲醛〔PFA，Polyformaldehyde〕因其优良组织保存能力、抗原保持能力，是目前最常用固定剂。以下是多聚甲醛溶液配制步骤、注意事项。

配制步骤：

1. 准备材料：准备好所需材料，包括多聚甲醛粉末、去离子水或蒸馏水、氢氧化钠〔NaOH〕、烧杯、磁力搅拌器还有pH计。

2. 溶解多聚甲醛：将适量多聚甲醛粉末加入到一定量去离子水中。通常状况下，会配置4%多聚甲醛溶液，这意味着每100毫升水中要加入4克多聚甲醛。为了促进溶解，可以先用少量热水湿润多聚甲醛粉末。

3. 添加氢氧化钠：于加热至60℃左右时，缓慢向溶液中加入氢氧化钠以帮助多聚甲醛完全溶解。注意控制温度不要过高，避免破坏蛋白质结构。

4. 调整pH值：当溶液变为透明后，使用pH计检测其酸碱度，理想pH范围应该接近7.4。如果pH不符合要求，则可通过继续添加氢氧化钠来调节。

5. 过滤和储存：最后通过微孔滤膜过滤去除不溶性颗粒，并将其存放于阴凉避光处备用。新鲜配制溶液效果最佳，但也可以冷藏保存几天。

注意事项：

操作过程中必须佩戴手套、防护眼镜，因为多聚甲醛具有一定毒性。
避免直接接触皮肤、眼睛，如果不慎溅入，请立即用大量清水冲洗并寻求医疗帮助。
配置完成后应尽快使用，长时间存放也许会导致性能下降。
不同类型样本也许要调整固定时间及浓度，因此建议根据具体需求进行适当修改。

通过以上方法正确配制出高质量多聚甲醛溶液，能够很好增强免疫组化成功率、准确性。