pfa多聚甲醛固定步骤_样本_溶液_组织学
发布时间：2025-05-27 22:00来源：原创
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摘要：
多聚甲醛〔PFA〕是一种常用组织学固定剂，大量用途于免疫组化、原位杂交实验中。其主要成分是多聚甲醛，通过甲醛聚合形式发挥固定作用。以下是PFA多聚甲醛固定步骤：
，准备1%至4%浓度PFA溶液。通常状况下，实验室会使用2%PFA作为标准浓度。将多聚甲醛粉末精确称量后，溶解于预热至6070℃磷酸缓冲液〔PBS〕或蒸馏水中。为了确保多聚甲醛完全溶解，可以轻轻搅拌或加热至溶液澄清透明。于此过程中，需避免过度加热，以免破坏组织样本。
接下来，将待固定组织样本用PBS清洗干净，并去除多余血液或其他杂质。然后将组织样本放入适当容器中，倒入已制备好PFA溶液，确保溶液完全覆盖组织。固定时间根据样本类型、实验需求而定，一般为4到24小时。于此期间，应将样本置于4℃环境中，以减缓化学反应速度并保护组织结构。
固定完成后，用PBS多次冲洗样本，以去除残留PFA溶液。冲洗后样本可进行后续处理，如脱水、透明化、包埋步骤。于整个操作过程中，务必佩戴手套、防护眼镜，避免直接接触PFA溶液，以防皮肤刺激或腐蚀。
PFA多聚甲醛固定是组织学研究中关键步骤，正确固定方法能够很好保持组织形态、抗原性，为后续实验提供可靠基础。
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