多聚甲醛固定细菌_细胞_蛋白质_溶液_措施

发布时间:2025-06-08 21:52来源:原创 帮助了16人
摘要:
多聚甲醛〔PFA〕是一种常用化学固定剂,大量用途于生物学、医学研究中。它通过交联蛋白质、其他生物分子来稳固细胞结构,常用于固定细菌以进行形态学观察或免疫荧光实验。

于固定过程中,多聚甲醛要溶解于水中形成4%溶液。然后将新鲜采集细菌样本置于该溶液中,于室温下静置1530分钟。于此期间,多聚甲醛会和细菌细胞表面及内部蛋白质有反应,形成稳固交联网络,从而保持细菌原有形态特征不变。为了确保固定彻底性,有时还要增强温度至37℃左右继续孵育一段时间。

固定完成后,要用PBS缓冲液多次洗涤样品以去除残留多聚甲醛,并避免后续操作时对细胞引发毒性影响。如果计划开展免疫荧光分析,则还需进行透化处理以便抗体能够进入细胞内部识别目标抗原。

使用多聚甲醛固定细菌具有优良保存效果,不仅能够一直维持其原始状态,还便于许多显微镜技术如共聚焦显微镜用途。不过要注意是,因为多聚甲醛也许引起某些敏感个体过敏反应,于操作时应做好个人防护措施并确保优良通风条件。另外,废弃固定液必须按照相关规定妥善处置以免造成环境污染。
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