4%多聚甲醛固定_样本_细胞_生物_蛋白质
发布时间:2025-06-08 21:58来源:原创
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摘要:
多聚甲醛固定是一种常用生物样本处理技术,大量用途于组织学、细胞生物学还有免疫荧光行业。该方法通过将多聚甲醛〔PFA〕和生物样本接触,利用其交联作用使蛋白质、核酸生物大分子稳固下来,从而保存样本结构特征。
,于进行多聚甲醛固定之前,要准备好适当浓度多聚甲醛溶液。通常状况下,实验室中使用多聚甲醛固定液为4%浓度,即每100毫升蒸馏水中溶解4克多聚甲醛。于配制过程中,需确保操作环境通风优良,并佩戴适当个人防护装备,如手套、护目镜,以避免吸入或直接接触有害物质。
接下来是具体固定步骤。将待固定组织块或细胞样品放入适量4%多聚甲醛固定液中,确保样本完全浸没其中。然后将其置于室温下静置一段时间,一般为15至20分钟。于此期间,多聚甲醛会通过化学反应和蛋白质中氨基有交联,形成稳固网状结构,很好防止样本内部成分降解。对于某些特殊类型样本,也许还要调整固定时间或温度条件。
完成固定后,应立即用缓冲液〔例如PBS磷酸盐缓冲液〕彻底清洗样本,去除残留多聚甲醛,以免影响后续实验结果。另外,于整个操作过程中,必须遵守无菌操作规范,防止污染,和此同时妥善处置废弃物,遵循环保要求。
4%多聚甲醛固定是一种简单而很好样本预处理手段,能够显著增强后续分析质量、可靠性。无论是研究细胞形态还是检测特定蛋白表达水平,这一技术都发挥着不可替代作用。
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