多聚甲醛固定免疫细胞_时间_功能_抗原_结构

发布时间:2025-04-29 22:58来源:原创 帮助了6人
摘要:
多聚甲醛〔Paraformaldehyde,PFA〕是一种常用固定剂,于免疫细胞研究中具有很大位。它通过交联蛋白质、核酸之间化学键,稳固细胞结构,从而保持其形态、功能特性。

于操作过程中,要将新鲜采集免疫细胞悬液均匀铺展于载玻片或培养皿上。然后缓慢加入适量多聚甲醛溶液,通常浓度为4%。让细胞和多聚甲醛充分接触,一般固定时间为1520分钟,具体时间需根据实验需求调整。固定完成后,用PBS缓冲液轻轻洗涤细胞两次以去除残留多聚甲醛。为了进一步增强固定效果,可进行透化处理,使用0.1%0.5% Triton X100溶液渗透细胞膜,使抗体能够更好进入细胞内部。

多聚甲醛固定优势于于能很好保留细胞内蛋白空间分布,和此同时对大多数抗原具有优良保存能力。但要注意是,过度固定也许会影响某些抗原检测,因此应控制固定时间、条件。另外,于整个操作过程中要避免剧烈震荡,以免损伤细胞结构。通过多聚甲醛固定免疫细胞,可以用于后续荧光标记、免疫荧光染色分析技术,为深入研究免疫细胞功能机制提供可靠样本。
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